Spjegazzjoni dettaljata tal-volatilizzazzjoni tar-reaġent fl-esperimenti tal-PCR

Spjegazzjoni dettaljata tal-volatilizzazzjoni tar-reaġent fl-esperimenti tal-PCR.

Fl-esperiment PCR, wara li żżid is-sistema ta 'reazzjoni, aħna nkopru bir-reqqa l-għatu u ripetutament nikkonfermaw li l-għatu huwa magħluq biex tiġi evitata l-volatilizzazzjoni tar-reaġent. Imma xi kultant għandna wkoll dubji: aħna kkonfermaw li l-għatu huwa magħluq sewwa, iżda wara li l-esperiment jitlesta, ir-reaġent xorta se jevapora. X'inhi r-raġuni?

Fil-fatt, il-volatilizzazzjoni tar-reaġent hija waħda mill-aktar problemi komuni fl-esperimenti tal-PCR, u hemm ħafna fatturi li jaffettwaw il-volatilizzazzjoni tar-reaġent.

L-evaporazzjoni tirreferi għal dak waqt l-esperiment tal-PCR, is-soluzzjoni ta 'reazzjoni tevapora f'temperatura għolja, u mbagħad tikkondensa fuq il-ħajt tal-flixkun jew il-qoxra ta' fuq biex tifforma ċpar ta 'ilma jew qtar ta' ilma, jew tiddejjaq direttament mid-distakk fl-arja tal-kappa tal-flixkun jew tal-film, li tirriżulta fi bidla fil-konċentrazzjoni tas-soluzzjoni tar-reazzjoni. Il-bidliet, l-ammont ta 'soluzzjoni ta' reazzjoni naqas, u xi wħud saħansitra evaporaw għan-nixfa, li jirriżultaw f'esperimenti invalidi.

1. Pressjoni tal-għatu sħun, temperatura

Fl-esperimenti tal-PCR, ġeneralment insaħħan l-għatu biex tevita l-kondensazzjoni tal-fwar tar-reaġent. It-temperatura ta 'l-għatu msaħħan hija ġeneralment ogħla minn dik tas-soluzzjoni ta' reazzjoni biex tevita l-kondensazzjoni tal-fwar.

L-għotjien tat-tisħin taċ-ċikler termali jistgħu jinqasmu bejn wieħed u ieħor fl-erba 'tipi li ġejjin: għotjien tat-tisħin mhux aġġustabbli, għotjien ta' tisħin aġġustabbli, għotjien ta 'tisħin adattivi, u għotjien awtomatiċi tat-tisħin. L-għatu imsaħħan aġġustabbli għandu kompressjoni li ma tagħmilx is-swaba '. Jekk mhux issikkat sewwa, ir-reaġenti se jevaporaw. L-evaporazzjoni tat-tarf tista 'tiġi mminimizzata billi tiżdied il-pressjoni fuq l-għatu msaħħan. Kultant taqbeż tista 'toqros it-tubu u ddawwar il-pum. Taħt ċirkostanzi normali, il-kopertura tat-tisħin intelliġenti elettrika tista 'tiskopri awtomatikament konsumabbli ta' għoli differenti, tikkompressa awtomatikament konsumabbli, u l-pressjoni hija uniformi u kostanti, u b'hekk tnaqqas l-evaporazzjoni tar-reaġent u żbalji manwali, u ttejjeb l-eżattezza u r-ripetibbiltà sperimentali.

2. Deformazzjoni tal-konsumabbli

Għal tnixxijiet bil-fwar, ħafna nies jaħsbu li l-pressjoni tal-għatu sħun mhix biżżejjed. Il-pressjoni tal-għatu sħun hija importanti ħafna, imma dak huwa aspett wieħed biss. Fil-fatt, konsumabbli huma wkoll importanti ħafna.

Pjanċi tal-orifiċju PCR huma ġeneralment magħmula minn materjali tal-plastik, li jespandu u jiddeformaw ħafna wara li jkunu msaħħna. Ir-rata ta 'espansjoni termali tal-bażi tal-metall PCR użata biex tpoġġi l-pjanċa tal-orifiċju PCR hija estremament baxxa, u l-pjanċa tal-orifiċju PCR ma tistax tespandi normalment tul il-pjan wara l-espansjoni termali. L-istat li jbatti jagħmel il-kopertura tas-sħana ta 'fuq ma tistax tikkuntattja kompletament il-wiċċ tal-pjanċa tal-orifiċju PCR, li tirriżulta f'temperatura u pressjoni irregolari, li tikkawża evaporazzjoni tar-reaġent fit-tarf tal-pjanċa tal-orifiċju PCR, u taffettwa l-effett ta' sejbien tal-PCR.

3. Il-konsumabbli mhumiex issiġillati sewwa

L-issikkar tal-għatu termali u l-konsumabbli ma jfissirx li l-għatu tat-tubu PCR huwa magħluq sewwa, u l-kwalità tal-pjanċa tal-bir PCR hija irregolari. Konsumabbli ta 'kwalità għolja, il-wiċċ taż-żennuna u l-għata huma bla xkiel, u s-siġill wara l-għata tal-kaxxa huwa tajjeb, u mhux faċli li tnixxi. Konsumabbli inferjuri għandhom spouts irregolari u linji radjali, li jistgħu faċilment jikkawżaw tnixxija jew saħansitra jinxfu.

Għalhekk, fl-esperimenti tal-PCR, ipprova tagħżel konsumabbli ta 'kwalità għolja u xierqa. Fl-istess ħin, is-sistema ta 'reazzjoni tista' titwessa 'biex titnaqqas l-influwenza ta' l-evaporazzjoni tas-sistema fuq ir-reazzjoni.